产品货号：
GS4959
中文名称：
HRP免疫组化试剂盒(大鼠)
英文名称：
HRP IHC Kit(Rat IgG)
产品规格：
100T|500T|1000T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒用于细胞或组织切片的免疫组织化学染色，适用于石蜡切片、冰冻切片和细胞涂片。
HRP标记的IgG (H+L)与组织切片上的一抗结合，再加入DAB显色液，HRP可以催化DAB显色液中的H2O2分解，使联苯胺氧化变成联苯亚胺，在组织切片的一抗结合的抗原位点上出现黄色或棕黄色着色。
保存：2～8℃，有效期1年，HRP标记的山羊抗大鼠IgG需置于-20℃保存。
相关搜索：HRP免疫组化试剂盒(大鼠)，免疫组化试剂盒，IHC试剂盒，HRP IHC Kit(Rat IgG)
HRP标记的IgG (H+L)与组织切片上的一抗结合，再加入DAB显色液，HRP可以催化DAB显色液中的H2O2分解，使联苯胺氧化变成联苯亚胺，在组织切片的一抗结合的抗原位点上出现黄色或棕黄色着色。
- 由于本试剂盒不再使用生物素，从而可以避免可能由生物素引起的非特异性背景显色，使得显色背景更清晰，阳性结果更特异。
- 本试剂盒操作简便，适用于进行大批量切片免疫组织化学染色。
| 组分 | 100T | 500T | 1000T |
| 试剂A：内源性过氧化物酶阻断剂 | 10mL | 50mL | 100mL |
| 试剂B：封闭液 | 10mL | 50mL | 100mL |
| 试剂C：HRP标记的山羊抗大鼠IgG | 50μL | 250μL | 500μL |
| 试剂D1：20×DAB缓冲液 | 0.5mL | 2.5mL | 5mL |
| 试剂D2：20×DAB底物 | 0.5mL | 2.5mL | 5mL |
| 试剂D3：20×DAB色原 | 0.5mL | 2.5mL | 5mL |
保存：2～8℃，有效期1年，HRP标记的山羊抗大鼠IgG需置于-20℃保存。
- 为获得最佳实验结果，请务必优化二抗稀释比例和DAB显色时间。
- 建议在实验过程中设置阳性与阴性对照，以防止假阳性或假阴性的结果。
- 一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度弱时，可提高一抗浓度或延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度或缩短孵育时间，增加洗涤次数或延长洗涤时间。
- 本试剂盒中的DAB色原为致癌物质，操作中应采用合理的防护措施。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 免疫组织化学染色的准备工作
- DAB显色工作液的配制
按照850μL蒸馏水分别加入试剂20×DAB缓冲液、20×DAB底物和20×DAB色原各50μL的比例稀释，混匀，即为DAB显色工作液。DAB显色工作液须现用现配。 - HRP标记的二抗的稀释
将HRP标记的二抗按照1:100～1000的比例用PBST或含1%BSA的PBST稀释。根据阳性结果的强弱，其稀释比例可以适当地提高或降低。
- DAB显色工作液的配制
- 石蜡切片染色
- 切片常规脱蜡至水。
- 对组织进行相应的抗原修复。
- 滴加100μL内源性过氧化物酶阻断剂，室温孵育10～15min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。
- PBST冲洗，5min×3次。
- 滴加100μL封闭液，室温孵育30～45min，倾去，不洗。
- 滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育2-3h或4℃过夜，次日室温孵育1h。
- PBST冲洗，5min×3次。
- 滴加50μL HRP标记的二抗，室温或37℃孵育30～60min。
- PBST冲洗，5min×3次。
- 滴加100μL DAB显色工作液，室温显色3～30min，可在显微镜下控制显色时间。蒸馏水冲洗。
- 如果需要，可进行苏木素复染。
- 常规脱水、透明、封片。
- 切片常规脱蜡至水。
- 血涂片、冰冻切片和细胞涂片染色
血涂片、冰冻切片和细胞涂片经固定后，步骤同石蜡切片2～12。
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